日前，來自中國的研究人員成功地在綠茶中的納米粒子（green nanoparticle）幫助下，順利地利用小干擾RNA（small interfering RNA，siRNA）載體渠道將藥物穿透了細(xì)胞膜。該物質(zhì)得名的原因是其內(nèi)含有綠茶天然形成的代謝物，具有抗氧化效果。綠茶中的納米粒子毒性很低，它可以與抗氧化劑復(fù)合形成一種獨(dú)特的藥物傳遞載體，可以有效地、安全地?cái)y帶精細(xì)的RNA藥物穿過特定的細(xì)胞膜。

綠茶的飲用已經(jīng)與預(yù)防心血管疾病和減肥等多種健康益處聯(lián)系在一起?，F(xiàn)在，通過向siRNA遞送載體提供稱為表沒食子兒茶素沒食子酸酯（EGCG）的抗氧化劑化合物，在未來的某一天，綠茶可能會同siRNA一樣獲得的醫(yī)學(xué)界的重視。

siRNA有時稱為短干擾RNA（short interfering RNA）或沉默RNA（silencing RNA），是一個長20-25個核苷酸的雙股RNA，在生物學(xué)上有許多不同的用途。目前已知siRNA主要參與RNA干擾（RNAi）現(xiàn)象，以帶有專一性的方式調(diào)節(jié)基因的表達(dá)。目前醫(yī)學(xué)界認(rèn)為，siRNA具有很大的治療潛力，因?yàn)樗鼈兛梢越档图膊∠嚓P(guān)基因的表達(dá)。然而，將siRNAs放入可以達(dá)到治療效果的細(xì)胞中一直是研究人員面臨的一項(xiàng)挑戰(zhàn)。由于siRNA相對較大且?guī)ж?fù)電荷，因此siRNA不易穿過特定細(xì)胞的細(xì)胞膜，并且它們可能非常容易被RNA扼制酶降解。

為了克服這些問題，一些研究人員嘗試用各種聚合物涂覆siRNA，以便達(dá)到保護(hù)作用。然而，大多數(shù)小聚合物不能使得siRNA自由地穿梭到細(xì)胞中，而且分子量較大的聚合物可能是有效但通常都具有一定的毒性。在期望的靶組織中實(shí)現(xiàn)臨床有效的基因沉默，同時避免免疫激活和毒性還遠(yuǎn)遠(yuǎn)沒有做到。病毒可以通過將shRNA表達(dá)基因整合到基因組中來介導(dǎo)長期的基因沉默，并且可以通過設(shè)計(jì)使其具有特定的組織傾向性，但是它們具有很多重大缺點(diǎn)。在血液中，病毒可能會被已存在的抗體清除，并且會激活補(bǔ)體或凝血因子。

siRNA可以從基因?qū)用嫔?strong>阻斷蛋白功能，達(dá)到很多小分子化學(xué)藥無法企及的藥理效果。RNA干擾2006年獲得諾貝爾獎，但是siRNA的醫(yī)學(xué)應(yīng)用現(xiàn)狀僅限于有限的局部遞送，因?yàn)槿狈τ行У倪f送載體。目前，siRNA的遞送主要通過陽離子載體材料和siRNA形成的納米復(fù)合物來實(shí)現(xiàn)藥物遞送。陽離子載體既可以通過正負(fù)電相互作用裝載siRNA藥物，也有助于遞送系統(tǒng)逃離溶酶體降解。

盡管如此，這類正電載體也面臨著諸多問題，比如陽離子材料的細(xì)胞毒性，對帶負(fù)電的細(xì)胞膜的非特異性吸附作用，納米粒大小非一致性以及納米粒在體內(nèi)循環(huán)系統(tǒng)中的穩(wěn)定性等，致使DNA、RNA等生物制劑體內(nèi)應(yīng)用在過去五、六十年中基本無解。比如備受矚目的CALAA-01，盡管設(shè)計(jì)精巧細(xì)致，但最終在三期臨床失敗，一個重要原因就是這類正電載體在人腎小球中會被人體帶負(fù)電的天然高分子競爭破壞，提前釋放siRNA藥物。

然而，華東師范大學(xué)和華南理工大學(xué)科學(xué)家開發(fā)的新方法似乎更為成功。由Yiyun Cheng領(lǐng)導(dǎo)研究團(tuán)隊(duì)決定使用已知的、可與RNA強(qiáng)烈結(jié)合的EGCG與小聚合物結(jié)合形成納米粒子，將siRNA安全地傳遞到細(xì)胞中。Cheng及其同事在9月19日出版的《ACS Central Science》雜志上發(fā)表了一篇文章，標(biāo)題為《綠茶兒茶素可顯著促進(jìn)低分子量聚合物介導(dǎo)的RNAi》。該文章的作者詳細(xì)地解釋道，“我們報告了一種簡便的策略，如何來制造具有強(qiáng)大siRNA遞送效率的核殼結(jié)構(gòu)的納米粒子，納米粒子是通過siRNA與綠茶兒茶素的熵驅(qū)動絡(luò)合制備的一種復(fù)合物，產(chǎn)生帶負(fù)電荷的核心，然后涂覆低分子量聚合物形成外殼。”

目前，對治療性RNAi的研究集中在三類遞送載體上：病毒、聚陽離子聚乙烯亞胺（PEI）納米顆粒和脂質(zhì)體。這三類都取得了一些成功，特別是在肝臟中誘導(dǎo)RNAi。盡管如此，在期望的靶組織中實(shí)現(xiàn)臨床有效的基因沉默，同時避免免疫激活和毒性還遠(yuǎn)遠(yuǎn)沒有做到。病毒可以通過將shRNA表達(dá)基因整合到基因組中來介導(dǎo)長期的基因沉默，并且可以通過設(shè)計(jì)使其具有特定的組織傾向性，但是它們具有很多重大缺點(diǎn)。在血液中，病毒可能會被已存在的抗體清除，并且會激活補(bǔ)體或凝血因子。它們還會誘導(dǎo)阻止重復(fù)施用的中和抗體應(yīng)答。通過插入突變使靶細(xì)胞中的基因表達(dá)失調(diào)是主要的安全問題，并且一些病毒僅在分裂細(xì)胞中整合。

此次Cheng在完成試驗(yàn)后表示，這種超分子策略有助于聚合物將siRNA縮合成均勻的納米粒子。作者繼續(xù)說，這些納米粒子可以在體外和體內(nèi)特異性地下調(diào)靶基因。納米粒子在試驗(yàn)中有效地敲除了培養(yǎng)細(xì)胞中幾種靶基因的表達(dá)，表明這些粒子可以穿過細(xì)胞膜。在腸損傷的小鼠模型中，納米顆粒被用于遞送靶向促炎酶的siRNA。這種干預(yù)改善了體重減輕、結(jié)腸縮短和腸道炎癥等癥狀。研究人員說，除了siRNA的基因沉默效應(yīng)外，EGCG還可以通過其抗氧化和抗炎特性促進(jìn)納米粒子的有效性。

研究人員總結(jié)道，“高效納米粒子適用于各種類型的、具有不同拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)和化學(xué)成分的聚合物，它也提供了一種多功能技術(shù)來打破陽離子聚合物的效率/毒性相關(guān)性，本研究中提出的策略允許開發(fā)一個有潛力、的用于聚合物介導(dǎo)的siRNA遞送平臺。”（新浪醫(yī)藥編譯/范東東）

文章參考來源：

1、Green Tea Antioxidant Helps Sneak RNA Drug into Cells

2、Delivery of siRNA to the mouse brain by systemic injection of targeted exosomes

3、Green Tea Catechin Dramatically Promotes RNAi Mediated by Low-Molecular-Weight Polymers